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不同配基密度下色氨酸层析介质吸附性能研究

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临床使用的HSA主要从健康人血浆中分离,由于国内血液来源有限,加上病毒污染等风险,药用HSA货源非常紧张,因此利用基因工程技术生产重组人血白蛋白(rHSA)具有重要的意义。目前酵母等表达体系已经成功构建,发酵水平高达10g/l以上,rHSA制备的难点在于分离纯化。比较成熟的纯化手段包括离子交换层析、疏水相互作用层析、染料亲和层析等,均已成功用于rHSA分离,步骤较多,且纯度难以达到药用标准[1]。此外,高密度培养的发酵液组分复杂,电导率较高,一般需要对料液进行预处理,如固液分离、pH和盐浓度调节等,可能造成目标蛋白损失,影响分离效率。;更多范文
康复论文
前期研究表明[2],不同基质和配基密度对蛋白吸附有较大影响,选择合适的基质材料和配基密度有利于提高蛋白的吸附性能。当配基密度较高时,被吸附的蛋白分子对部分配基具有屏蔽作用,导致该配基无法再结合其它蛋白分子,而这种屏蔽作用随配基密度的增大而增加,因此配基密度的进一步增加并不能持续提高吸附容量。此外,蛋白占据介质的孔道表面及孔内空间,降低配基的可及性,增加了扩散阻力,形成空间位阻效应。在低配基密度下,配基较分散,蛋白的结合随配基数目的增大而增多,因而吸附容量逐渐上升;随配基密度的进一步提高,蛋白与配基分子之间的空间位阻效应逐渐增强,蛋白吸附受到限制。

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